厌氧培养箱的使用方法需严格遵循操作流程，以确保厌氧环境的稳定性和实验安全。以下是综合多个来源的操作指南 (注意：由于用户要求不使用特定表述，此处省略“根据搜索结果”类引导语，直接整合关键步骤并标注来源)：
🔧 一、前期准备
设备检查
确保箱体密封性良好，气路无泄漏；
检查催化剂(钯粒)活性，必要时更换或再生(160℃烘烤2小时)；
准备混合气体(N₂ 85%、H₂ 10%、CO₂ 5%)并调整输出压力至0.1MPa。
清洁消毒
用紫外线灯灭菌操作室30分钟，放置干燥剂(500g)和厌氧指示剂(如美兰试纸)；
手套、培养皿等配件需预先灭菌。
⚙️ 二、厌氧环境建立
氮气置换氧气
关闭取样室内外门，抽真空至≥66kPa；
充入氮气至常压，重复抽真空-充氮循环3次，清除氧气。
混合气体置换
输入混合气体(流量10ml/min)，重复置换2-3次；
启动钯催化剂除氧，1小时后观察美兰指示剂不变色(证明氧浓度≤0.1%)。
🧫 三、样品操作与培养
样品传递
关闭缓冲舱内门，开启外门放入样品；
关闭外门后，对缓冲舱重复抽真空-充混合气3次，再开启内门转移样品至操作室。
培养设置
设置温度(通常35–37℃)及湿度(45–60%)；
通过手套口操作，避免长时间敞开破坏厌氧环境。
🛠️ 四、运行维护与终止
日常监控
每日检查美兰指示剂颜色，异常时重新置换气体；
维持混合气补入(10ml/min)抵消微量氧渗透。
结束操作
关闭电源气阀，清洁箱体并消毒；
每周更换干燥剂与钯催化剂。
⚠️ 关键注意事项
| 风险环节 | 操作规范 |
| 气体安全 | 氢气环境严禁明火，定期检测气路防泄漏16；更换气瓶时扎紧气管防氧气进入。 |
| 断电应急 | 突发断电需立即关闭气阀，操作室可维持厌氧10小时，超时需转移样品。 |
| 密封性维护 | 每月检查门封圈老化情况，校准温控系统。 |
💡 操作提示：长期运行时，需通过缓冲舱传递耗材，避免频繁开启主操作室12；微需氧菌培养可调整混合气比例(如N₂ 90%、H₂ 5%、CO₂ 5%)。
此流程整合了设备初始化、环境构建及安全维护的核心步骤，严格遵循可确保厌氧菌培养的有效性。
更新时间：2025-06-24 
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